| 貨號 | MS-4601W SMS-4702WS | 規(guī)格 | 1箱 |
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| 供貨周期 | 一個月 | 主要用途 | 再生醫(yī)學(xué)、干細(xì)胞庫、日本細(xì)胞培養(yǎng)中心CPC（Cell Processing Ce |
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| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥,綜合 | | |
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CP-1細(xì)胞凍存液(臨床級凍存液)
?獲得日本再生醫(yī)學(xué)等產(chǎn)品材料的資格認(rèn)證
1.產(chǎn)品從1992年開始推廣應(yīng)用
2.在日本國內(nèi)的GMP設(shè)備中生產(chǎn)制造
3.進(jìn)行了非臨床實(shí)驗(yàn)
5.可以在-80℃的冰箱中冷凍保存
6.不含動物來源的成份
7.成分公開透明
8.擁有日本原料藥注冊證(MF)
應(yīng)用實(shí)例
I 懸浮細(xì)胞和貼壁細(xì)胞的冷凍方法
II 使用CP-1HG冷凍保存/解凍造血干細(xì)胞的方法
III。 使用CP-1HG間充質(zhì)干細(xì)胞冷凍保存/解凍方法
冷凍保存液的制備
·1.CP-1高等級，25％HSA，將介質(zhì)冷卻至4℃。
·2.將CP-1高級6.8 mL，25％HSA 3.2 mL和10.0 mL培養(yǎng)基加入離心管中，并均勻混合。
·3.即將使用之前，請保存在4℃下。
細(xì)胞冷凍保存
·1.用剝離溶液收集要冷凍保存的細(xì)胞，并計數(shù)細(xì)胞數(shù)。
·2.離心除去上清液。
·3.預(yù)先添加已冷卻至4°C的CP-1高品位/ 25％HSA /培養(yǎng)基（冷凍保存液-2的制備），均勻懸浮至1×106細(xì)胞/ mL。
·4.將各1 mL放入冷凍管中，放入冷凍容器中，并在-80°C緩慢冷凍。
·5.第二天移至液氮或-150℃的深冷柜中。
解凍細(xì)胞
·1.事先在離心管中準(zhǔn)備9 mL培養(yǎng)基。
·2.從液氮中取出冷凍的冷凍管，并在37°C的溫水浴中快速融化。
·3.將所有解凍的細(xì)胞添加到培養(yǎng)基中并離心。
·4.除去上清液，并添加適量的培養(yǎng)基。
·5.在每種使用的細(xì)胞類型的最佳條件下進(jìn)行培養(yǎng)。
IV 評價結(jié)果(間充質(zhì)干細(xì)胞冷凍保存)
V 使用CP-1HG冷凍保存iPS / ES細(xì)胞并進(jìn)行評估
Ⅰ． 懸浮細(xì)胞和貼壁細(xì)胞的冷凍方法
Ⅱ．CP-1®High Grade冷凍保存/解凍造血干細(xì)胞的方法Ⅲ．CP-1®High Grade應(yīng)用于間充質(zhì)干細(xì)胞冷凍保存/解凍方法
冷凍保存液的制備
·1.CP-1高等級，25%HSA，將介質(zhì)冷卻至4℃。
·2.將CP-1高級6.8 mL，25%HSA 3.2 mL和10.0 mL培養(yǎng)基加入離心管中，并均勻混合。
·3.即將使用之前，請保存在4℃下。
細(xì)胞冷凍保存
·1.用剝離溶液收集要冷凍保存的細(xì)胞，并計數(shù)細(xì)胞數(shù)。
·2.離心除去上清液。
·3.預(yù)先添加已冷卻至4°C的CP-1高品位/ 25%HSA /培養(yǎng)基(冷凍保存液-2的制備)，
均勻懸浮至1×106細(xì)胞/ mL。
·4.將各1 mL放入冷凍管中，放入冷凍容器中，并在-80°C緩慢冷凍。
·5.第二天移至液氮或-150℃的深冷柜中。
解凍細(xì)胞
·1.事先在離心管中準(zhǔn)備9 mL培養(yǎng)基。
·2.從液氮中取出冷凍的冷凍管，并在37°C的溫水浴中快速融化。
·3.將所有解凍的細(xì)胞添加到培養(yǎng)基中并離心。
·4.除去上清液，并添加適量的培養(yǎng)基。
·5.在每種使用的細(xì)胞類型的最佳條件下進(jìn)行培養(yǎng)。
Ⅳ．評價結(jié)果（間充質(zhì)干細(xì)胞冷凍保存）
[目的]關(guān)于有望在將來用于再生醫(yī)學(xué)的人間充質(zhì)干細(xì)胞(hMSCs)可以冷凍保存在CP-1高等級中，并可以通過廉價，方便的干冰穩(wěn)定地長期運(yùn)輸嗎？
[方法]將人脂肪來源的間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC-AT)或人骨髓來源的間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC-BM)冷凍在CP-1High Grade或?qū)φ罩?下圖中的A)(1 x 106細(xì)胞) / mL)，并儲存在液氮罐中。 儲存在液氮罐中后，應(yīng)在假定干冰運(yùn)輸(-80°C·7天，-60°C·3天，60°C·7天)，融化后立即存活率和第二天培養(yǎng)的每種條件下儲存 確認(rèn)對血管的粘附率(粘附率=活細(xì)胞數(shù)/接種的活細(xì)胞數(shù))。
[結(jié)果]在所有條件下，融化后的存活率均為90%以上，未觀察到差異(下圖B)。 然而，在冷凍的hMSC作為對照中，解凍后的第二天在-60°C儲存時觀察到許多未粘附在培養(yǎng)箱中的死細(xì)胞，但是在CP-1中冷凍的hMSC中幾乎沒有觀察到死細(xì)胞，并且?guī)缀鯖]有觀察到所有死細(xì)胞。 連接細(xì)胞(下圖中的B和C)。
[結(jié)論]由于干冰本身的溫度約為-80°C，因此我們認(rèn)為在CP-1High Grade中冷凍的hMSC可以使用干冰穩(wěn)定且長期運(yùn)輸。
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